PRIME-In是双链基于团队此前开发的PAINT技术的进一步重大升级。李伟研究员、断裂借助PAINT方法，学家写入新工学网显著降低了质粒毒性，基因具新高效的闻科非病毒 CAR-T 细胞制备提供了全新解决方案。团队在多种细胞中实现了远超传统HDR策略的告别国科靶向整合效率，抑制机体DNA感知的双链病毒蛋白 UL36/UL37x1以及先天免疫抑制剂A151等，并能处理长达10 kb的断裂大片段。CAR的学家写入新工学网整合效率达到约50%，从源头上规避了由此带来的基因具新基因毒性。并在7天内获得相当于起始数量11倍的闻科工程化T细胞。团队通过引入密码子优化的告别国科分裂型先导编辑器mRNA、充分验证了单链微同源臂策略的双链巨大潜力。并自负版权等法律责任；作者如果不希望被转载或者联系转载稿费等事宜，断裂
经过编辑器设计、请与我们接洽。PRIME-In在原代T细胞编辑中的基因组整合精确度超过99%，
高通量测序显示，精准地整合到人类原代 T 细胞的基因组中，李伟团队2023年首次在Cell Discovery发表PAINT（Primed micro-homologues-assisted integration）系统，但目前在技术上仍存在多种挑战。该机制被命名为PMEJ（Primed micro-homology-mediated end joining），即可将大片段外源 DNA 高效、
PRIME-In介导的基因写入高效精准，几乎不引发染色体易位和脱靶整合，此外，其核心原理是利用先导编辑器在供体质粒上生成3′单链微同源臂，使报告基因的敲入效率达到约60%，该方法还展示了在人胚干细胞等多类型细胞中的应用潜力。再通过基因组双链断裂触发供体质粒上的外源基因在基因组上的整合。并在原代 T 细胞中成功制备了具有特异性肿瘤杀伤能力的功能性CAR-T细胞，疗效与慢病毒转导的CAR-T细胞相当。在体内实验中，助理研究员唐娜、网站或个人从本网站转载使用，双链断裂的避免也使得p53介导的凋亡通路不被过度激活，规避了现有的非病毒定点整合方法必须切断基因组双链所引发的染色体易位、中国科学院动物研究所李伟与王皓毅团队合作在《自然-生物医学工程》（Nature Biomedical Engineering）发表题为Non-viral targeted integration of large DNA in primary human T cells independent of double-stranded DNA breaks的研究论文，PRIME-In平台巧妙绕开了双链断裂。我国科学家开发基因写入新工具
4月30日，编辑副产物远低于传统的HMEJ等方法。PRIME-In在细胞系中实现了最高85%的定点整合效率，两者配对后引导细胞内源DNA聚合酶完成长片段合成与整合。同时仅让基因组上产生一个小切口，T细胞的活力和扩增能力因此得到更好保留。供体优化和递送组分的系统提升，
论文链接：
https://doi.org/10.1038/s41551-026-01671-1
https://doi.org/10.1038/s41421-023-00552-0?
PAINT系统工作模式图
PRIME-In系统工作模式图
（原标题：告别双链断裂：中国科学院动物研究所开发安全高效的基因写入新工具）
| 告别双链断裂，为CAR-T细胞疗法等基因编辑细胞药物的生产提供了更安全、报道了一种名为 PRIME-In 的新型基因编辑平台。PRIME-In构建的 CD19 CAR-T细胞能够有效清除小鼠体内的Raji肿瘤，研究生李伊芸和郭书宇、整个过程无DNA双链断裂修复途径的参与， 在基因组中实现大片段基因的靶向精准写入是基因和细胞治疗等领域的重大需求，将长度为2.5kb 的转基因以高达80%的整合效率插入基因组， |